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    微生物接種主要方法

    發布時間: 2016-10-31   

    斜面接種法
    此法主要用于移種純菌,使其增殖后用于鑒定或保存菌種。通常是從平板培養物上挑取某一單獨菌落或者從一支已長好的斜面菌種,移種至斜面培養基上,接種步驟如下:
    (一)左手拿兩支試管,一支為經滅菌的斜面,另一支為已長好的菌種。右手持接種環或接種針通過火焰滅菌后冷卻,并同時以右手小指和無名指輕輕拔取兩支試管的棉塞或試管帽(先轉動棉塞后拔去),夾持于手指間。
    (二)將試管口通過火焰數次,并稍轉動,以防止外界的污染。
    (三)首先將接種環伸入有菌試管,使接種環接觸菌苔取少量菌,取出接種環,立即將管口通過火焰滅菌后將接種環伸入斜面管內,先從斜面底部到頂端拖一條接種線,再自下而上的蜿蜒涂布,或直接自斜面底部向上蜿蜒涂布。此步注意接種環不可碰試管壁和接種時不要劃破培養基。
    (四)燒試管口,塞好棉塞或蓋好試管帽,將接種環插到酒精瓶中。
    平板劃線接種法(分離培養法)
    是將細菌分離培養的常用技術,其目的是將混有多種細菌的培養物,或標本中不同的細菌使其分散生長,形成單個菌落或分離出單一菌株,便于識別鑒定。平板劃線接種方法較多,其中以分段劃線法與曲線劃線法較為常用。 
    (一)分段劃線法:本法多用于含菌量較多的標本。方法是以接種環沾取少許樣品先涂布于平板培養基表面一角作為第一段劃線(劃線時接種環與培養基表面呈45度角),然后將接種環置火焰上滅菌,冷卻(可接觸平板試之,如不融化瓊脂,即已冷卻),于第二段處再作劃線,且在開始劃線時與第一段的劃線相交接數次,以后劃線不必再相接,待第二段劃完時,再如上法滅菌,接種劃線,依次劃至最后一段,滅菌接種環。這樣每一段劃線內的細菌數逐漸減少,即以獲得單個菌落,劃線接種完畢,蓋好平皿蓋,倒置(平板底部向上)于37℃溫箱中培養。
    (二)連續劃線法:此法多用于接種材料中含菌數量不太多的樣品或培養物。方法是先將樣品或培養物涂于平板表面的一角,然后用接種環自樣品涂擦處開始,向左右兩側劃開并逐漸向下移動,連續劃成若干條分散的平等線。
    液體接種法
    此法多用于單糖發酵試驗等,接種方法與斜面接種方法基本相同。以左手持培養基與菌種管,右手持接種環和拔持棉塞,將挑取的菌落或菌液接種于液體培養基內。

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