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    冷凍保存細胞的解凍與復蘇

    發布時間: 2017-02-21   

    冷凍保存細胞的解凍與復蘇要點:慢凍快融

    (1)快速解凍。凍存細胞液氮中取出后,應立即放入 37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在 1 分鐘內全部融化(不要超過 3 分鐘)。

    (2)解凍操作過程動作要輕。由于冷凍保存過的細胞變得非常脆弱,不僅解凍速度要快,而且動作要輕。一般情況下,解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養液的細胞培養瓶中直接進行培養(1ml 凍存細胞液加入到 25-30ml 新鮮完全培養液中),24 小時后再用新鮮完全培養替換舊培養液,以去除 DMSO。如果,細胞對冷凍保護劑特別敏感,那么,解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含完全生長培養液的培養瓶中。

    特別注意:

    (1)解凍時務必注意安全,預防冷凍管爆裂。,要帶手套,用鑷子將細胞冷凍管從液氮中取出,放入 37℃水浴中。切不可直接用手,以免凍傷。

    (2)冷凍管在水浴中解凍時,要將凍存管蓋子擰緊,確定擰緊后再投入水浴鍋中,注意液面不可超過凍存管蓋面,否則,易發生污染。


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